ATCC細(xì)胞是指由ATCC提供的已經(jīng)經(jīng)過(guò)鑒定和保種的細(xì)胞株，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的研究和實(shí)驗(yàn)中。在使用ATCC細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常需要將細(xì)胞從培養(yǎng)基中分離出來(lái)。由于細(xì)胞表面存在許多蛋白質(zhì)和多糖等物質(zhì)，這些物質(zhì)會(huì)與培養(yǎng)基中的其他成分相互作用，導(dǎo)致細(xì)胞難以被分離出來(lái)。因此，需要使用一些特殊的方法來(lái)去除這些物質(zhì)，以便更好地分離細(xì)胞。

　　EDTA可以通過(guò)與細(xì)胞表面的鈣離子結(jié)合，形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，從而使細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)和多糖等物質(zhì)失去活性。具體來(lái)說(shuō)，當(dāng)EDTA與鈣離子結(jié)合后，會(huì)形成一個(gè)五元環(huán)結(jié)構(gòu)的螯合物，這個(gè)螯合物可以與細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)和多糖等物質(zhì)結(jié)合，從而使其失去活性。這樣就可以通過(guò)離心等方法將細(xì)胞從培養(yǎng)基中分離出來(lái)。

　　EDTA分離ATCC細(xì)胞的步驟：

　　1.將細(xì)胞培養(yǎng)在含有10%FBS的培養(yǎng)基中，直到它們達(dá)到80-90%的密度。

　　2.用PBS洗滌一次細(xì)胞，以去除殘留的培養(yǎng)基和其他雜質(zhì)。

　　3.向細(xì)胞中加入1-2毫升的0.25%胰蛋白酶-EDTA混合液(每毫升含0.25克胰蛋白酶和10毫克EDTA)，并在室溫下孵育5-10分鐘。

　　4.輕輕搖晃培養(yǎng)瓶使胰蛋白酶-EDTA混合液均勻分布到整個(gè)培養(yǎng)瓶中。

　　5.在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞是否已經(jīng)從培養(yǎng)瓶壁上脫落下來(lái)。如果還有殘留的細(xì)胞，可以再次加入少量的胰蛋白酶-EDTA混合液并繼續(xù)孵育幾分鐘。

　　6.用移液器將消化后的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中，并用PBS稀釋至適當(dāng)濃度。

　　7.在室溫下離心5分鐘，使細(xì)胞沉淀下來(lái)。然后用吸管將上清液吸出并將沉淀重新懸浮在適量的PBS中即可。